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大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 STI NUPharose FF

产品/服务:
有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-07-22 01:16
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“大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 STI NUPharose FF”参数说明

有效期: 36个月 型号: Nrpb010L、nrpb10s
规格: 1 ml,5 ml,25ml预装柱 包装: 西林瓶,预装柱
产量: 100000

“大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 STI NUPharose FF”详细介绍

  STI-琼脂糖凝胶FF

  品名  STI-琼脂糖凝胶FF

  英文名  Soybean Trypsin Inhibitor NUPharose Fast Flow,STI NUPharose FF

  目录号  NRPB010L、NRPB10S(预装柱)

  规格  20 ml,100 ml,1L,1 ml预装柱,5 ml预装柱,10 ml预装柱,特殊规格订制

  运输  2~30℃,常压、避光

  贮存  20%乙醇,2~25℃

  保质期  3年

  相关介绍:

  STI-琼脂糖凝胶FF是一种将大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有载量高,非特异性吸附少,流速快等特点,主要用于胰蛋白酶、糜蛋白酶、凝血X因子等丝氨酸蛋白酶的提取和纯化,也可以用于肠激酶的去除。

  技术指标:

  基质  4%琼脂糖凝胶微球

  配基  STI

  配基密度  ~6 mg/ml

  填料粒径  60~180μm

  最大流速  800 cm/h

  推荐流速  20~100 cm/h

  pH稳定性  pH 3~9

  耐反压  0.3 MPa

  载量  ≥30 mg/ml胰蛋白酶

  保存条件  2~8℃保存于20%乙醇溶液中

  使用方法:

  1.装柱

  1.1根据分离目标性质配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。

  1.2将凝胶抽干,并用蒸馏水洗涤2次去除保存的乙醇,用蒸馏水配成匀浆并脱气。

  1.3将层析柱垂直固定,底端用水或缓冲液润湿并保持一段液位。

  1.4用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,使凝胶在柱内自由沉降。

  1.5连结好柱子顶端活动柱头,打开蠕动泵,让缓冲液用使用时操作流速流过5柱体积,再使用1.5倍的操作流速流过5个柱体积,调节适配柱头,使其尽量贴近胶面,最后用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。

  注意:

  1)所有操作过程不能引入气泡,保证装胶的均匀度。

  2)如无条件做1.2,填料层有气泡,可进行2次装柱,去除保存的乙醇和气泡。

  3)乙醇等试剂配制的溶液需要脱气。

  2.平衡

  将平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱,观察检测器的变化,直到UV、pH等参数不变。推荐的平衡缓冲液为:50 mM Tris-HCl,500 mM NaCl,pH 8.0.

  3.上样

  切换转换阀进行上样,上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可进行线性实验找到最佳上样量;样品的预处理:置换缓冲液,澄清过滤(0.45、0.22μm)等。

  4.冲洗

  用2~3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱,观察检测器的变化,直到UV、pH等参数不变。

  5.洗脱

  一般用酸性缓冲液进行洗脱。推荐的洗脱缓冲液为:100 mM Glycine-HCl,500 mM NaCl,pH 3.0.洗脱后的样品应尽快调节至中性,比如加入1/10体积的2 M Tris-HCl(pH 8.0)。

  6.清洗

  可以用平衡缓冲液和洗脱缓冲液反复清洗,本填料的活性基团为蛋白质,不能耐受强酸、强碱、强有机溶剂的清洗。 

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